Justin Timberlake'in öz kardeşi yoktur. Ünlü şarkıcının ebeveynleri o henüz üç yaşındayken boşanıp ikinci evliliklerini yapmışlardır. Babasının ikinci evliliğinden biri kız ikisi erkek olmak üzere üç üvey kardeşi dünyaya gelmiştir. Justin Timberlake'in en küçük üvey kardeşi kendisinden 12 yaş küçüktür. Justin Timberlake'in üvey kız kardeşi olan Laura Katherine doğumundan bir süre sonra vefat etmiştir. O sıralar "*NSYNC" grubunda solist olan Justin Timberlake grubun aynı isimde çıkardığı ilk albümünün bir parçasında ölen kardeşinden Türkçesi "Cennetteki Meleğim" olan "My Angel in Heaven" olarak bahsetmiştir.
