Radioinmunoensayo (RIA)

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Fue desarrollada en 1960 por dos endocrinólogos, S. A. Berson y Rosalyn Yalow, para determinar las concentraciones de complejos de insulina y antiinsulina en diabéticos.

Se reconoció en 1977, unos años después de morir Berson, por la adjudicación de un premio Nobel a Yalow.

Elprincipio del RIA implica la unión competitiva de antígeno radiomarcado yantígeno no marcado a un anticuerpo de alta afinidad.

Radioinmunoensayo = Pelea de Ag por sitios de Ab.

Procedimiento.

El antígeno marcado se mezcla con anticuerpo a una concentración que satura los sitios de unión a antígeno del anticuerpo. 

En seguida se añaden en cantidades crecientes las muestras de antígeno no marcado de concentración desconocida. 

El anticuerpo no distingue el antígeno marcado del no marcado, por lo que los dos tipos de antígeno compiten por los sitios de unión disponibles en el anticuerpo. 

En si, hay 2 Ag uno marcado y otro no, el marcado se mezcla con Ab y satura sus sitios de unión, luego se añade el no marcado y ambos compiten por acaparar los sitios de unión del Ab.

Sehan creado diversos RIA de fase sólida que hacen más fácil separar el complejoAg-Ab del antígeno no unido. En algunos casos el anticuerpo se une por enlacescruzados covalentes a cuentas de Sepharose. La cantidad de antígenoradiomarcado unido a las cuentas puede medirse después de centrifugar y lavarestas últimas.

Aplicaciones: Medición de hormonas, proteínas séricas, fármacos y vitaminas a concentraciones minimas de 0.001 microgramos por mililitro o menos. 

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