· Os microscópios ópticos usam lentes de vidro para desviar e focar a luz produzindo assim imagens ampliadas de pequenos objectos. As oculares servem para focar a imagem no olho, embora também ampliem.
· Objectivas com grandes aberturas numéricas e grande poder de resolução têm curtas distâncias de trabalho.
· A resolução do microscópio óptico (capacidade da lente separar ou distinguir entre dois objectos extremamente próximos) é determinada pela abertura do seu sistema de lentes e pelo comprimento de onda da luz que é empregue. Quanto menor for o comprimento de onda, maior será a resolução.
· Quando raio de luz passa de um meio para o outro ocorre refracção, o raio é desviado na interface.
· Óleo de imersão (objectiva de 100): Promove uma continuação do meio, impedidndo a perda de informação, obrigando os raios de luz a dirigirem-se todos para a objectiva.
Microscopia de campo escuro ou fundo escuro
- Apenas os raios que foram reflectidos pelo espécimen ou refractados é que formam a imagem.
- O campo que rodeia o espécimen surge preto, enquanto o objecto está fortemente iluminado.
Microscopia de contraste de fase
- À medida que os raios de luz passam pela célula alguns vão ser desviados devido a variações na densidade e no índice de refracção dentro do espécimen, que vão ser focados para formar a imagem do objecto.
- O fundo será brilhante formado pela luz não desviada, enquanto o objecto surge escuro e bem definido.
Microscopia de fluorescência
- Baseia-se no conceito de fluorescência, que está relacionado com o comprimento de onda do fotão emitido por determinada substância.
- Permite determinar a localização de uma molécula através da sua emissão de luz.
- Geralmente os espécimen foram corados com moléculas designadas fluorocromos que emitem luz quando excitados com luz de um determinado comprimento de onda.
- Imunofluorescência: tipo específico desta microscopia. GFP (green fluorescent protein) é uma substância fluorescente da medusa.
- Vantagem de se poder observar em células vivas.
